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细胞传代培养成功的条件

一、细胞培养的条件和要求 1.所有与细胞接触的设备、器材和溶液等,都必须保持绝对无菌,避免细胞外微生物的污染. 目前最可靠和最常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌. 如:玻璃制品、布类、金属制品:6.8kg20min. 橡胶制品:3.6~4.5kg

灭菌.

同一物质在细胞内外的分布的数量不同,当某一种极溶于水的物质在细胞外浓度过大时,有可能导致细胞干瘪死亡,这些物质在细胞内过多时导致细胞过量吸水膨胀

要做细胞培养的话,硬件条件包括:细胞室(最好带空气净化系统),超净工作台,培养箱,离心机,冰箱,显微镜(倒置),常规培养耗材及移液枪等.操作原则:无菌(最基本的),培养环境的稳定(温湿度保持恒定,不轻易改变培养基及添加物等,传代换液时操作要快,尽可能缩短在培养箱外的操作时间)使用的试剂有:培养基,PBS,传代用消化液,血清,抗生素(青链霉素),培养用添加物(非必需氨基酸,细胞生长因子等)

一、原理 细胞在培养瓶长成致密单层后,已基本上饱和,为使细胞能继续生长,同时也将细胞数量扩大,就必须进行传代(再培养).传代培养也是一种将细胞种保存下去的方法.同时也是利用培养细胞进行各种实验的必经过程.悬浮型细胞直

细胞培养的概念:细胞培养也叫细胞克隆技术,在生物学中的正规名词为细胞培养技术.不论对于整个生物工程技术,还是其中之一的生物克隆技术来说,细胞培养都是一个必不可少的过程,细胞培养本身就是细胞的大规模克隆.细胞培养技术

1.传代培养时要注意无菌操作并防止细胞之间的交叉污染.所有操作要尽量靠近酒精灯火焰.每次最好只进行一种细胞的操作.每一种细胞使用一套器材.培养用液应严格分开. 2.每天观察细胞形态,掌握好细胞是否健康的标准:健康细胞的形态饱满,折光性好,生长致密时即可传代. 3.如发现细胞有污染迹象,应立即采取措施,一般应弃置污染的细胞,如果必须挽救,可加含有抗生素的BSS或培养基反复清洗,随后培养基中加入较大量的抗菌素,并经常更换培养基等.

传代细胞的培养步骤如下:(1)人无菌室之前用肥皂洗手,用75%酒精擦拭消毒双手;(2)细胞传代前先在倒置显微镜下观察细胞形态,确定细胞是否需要传代及细胞需要稀释的倍数观察;(3)打开超净工作台的紫外灯照射台面30 min左右

博凌科为生物科技-为你解答:1、合适的细胞培养基合适的细胞培养基是体外细胞生长增殖的最重要的条件之一.培 养基不仅提供细胞营养和促使细胞生长增殖的基础物质,而且还提供培养细胞生长

拿到的细胞,如果是冻存的,首先要复苏,步骤是,取出立刻用37摄氏度水浴溶解,然后离心去冻存液,加入十倍体积的培养液,悬浮,离心去培养液,再加入培养液,转入培养瓶培养即可.关键是快速解冻. 传代是细胞在培养瓶中长满后,去培养液,胰酶消化使细胞脱壁,转入离心管离心,去消化液,用培养液悬浮,取部分细胞悬液(按需要)接入新的培养瓶,加入足够的培养液培养即可.

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